核酸提取系列连载(二)
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发布时间:2020.11.30 新闻来源:品科研超市-河北品科研生物科技有限公司官网 浏览次数:689 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
核酸提取系列连载(二) 一、DNA提取方法简介——1、基因组DNA的提取——1.2、SDS法 & 1.3、其它
核酸是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象,因此核酸的提取是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。为帮助广大科研工作者进一步掌握核酸提取方法并对实验中常见问题进行处理,德航五洲特推出核酸提取系列,相关问题可在评论区留言。
一、DNA提取方法简介
1、基因组DNA的提取 1.2、SDS法 u SDS法原理 SDS是一种阴离子去垢剂,在高温(55~65℃)条件下能裂解细胞,使染色体离析,蛋白变性,释放出核酸; 提高盐(KAc或NH4Ac)浓度并降低温度(冰浴),使蛋白质及多糖杂质沉淀,离心后除去沉淀; 上清液中的DNA用酚/氯仿抽提,反复抽提后用乙醇沉淀水相中的DNA。 u SDS法DNA提取缓冲液
u 改良的SDS法
水浴 60min, 其间缓慢摇动几次。加入150ul 的5mol/ LKac, 混匀, 冰浴15min 左右 u SDS法流程图 (以动物组织为例)
1.3、其它 根据细胞裂解方式的不同有:
根据核酸分离纯化方式的不同有:
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