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JF0103 蛋白酶抑制剂Cocktail(不含EDTA, 100X in DMSO 液体)
发布时间:2023.11.16 新闻来源:品科研-生物试剂,化学试剂,科学服务试剂超市-河北品科研生物科技有限公司 浏览次数:263
 

产品介绍

当在体外从细胞和组织中提取蛋白时,粗细胞提取物含有许多能够降解目的蛋白的内源酶,例如磷酸酶和蛋白酶。这些酶从细胞内释放出来或被激活,导致目的蛋白分解,影响分析结果。为了避免这种情况的出现,提高目的蛋白产量的最佳方法是加入相关酶的抑制剂。蛋白酶抑制剂组分清晰,浓度明确cocktail6个成分组成,包括对半胱氨酸、丝氨酸、天冬氨酸蛋白酶和氨基肽酶具有广泛特异性的 AEBSFAprotininBestatinE-64Leupeptin Pepstatin A,不含 EDTA产品兼容性好,高效抑制多种蛋白酶,全面保护蛋白不被降解该蛋白酶抑制剂 cocktail 已经用哺乳动物细胞和组织提取物进行了优化和测试具有高效抑制自动物、植物、细菌、酵母、真菌样品中的丝氨酸蛋白酶,半胱氨酸蛋白酶及金属蛋白酶在内的多种蛋白酶,方便可靠地保护您的蛋白。组分浓度

成分

浓度

靶点

类型

AEBSF

104 mM

Serine proteases

Irreversible

Aprotinin

80 µM

Serine proteases

Reversible

Bestatin

5 mM

Aminopeptidases

Reversible

E-64

1.5 mM

Cysteine proteases

Irreversible

Leupeptin

2 mM

Serine and cysteine proteases

Reversible

Pepstatin A

1.5 mM

Aspartic proteases

Reversible


产品名片

货号

JF0103

名称

蛋白酶抑制剂Cocktail (不含EDTA, 100X in DMSO液体)

英文名

Protease inhibitor cocktail for general use, without EDTA, 100X

质量标准

Biotech Grade

储存温度

-20 ℃,避免反复冻融

包装规格

1mL,10x1mL

保质期

2


产品图片


产品应用与相关问答

1本产品适用于Western Blot, Co-IP, pull-down, IF, IHC, kinase assay等实验。

2在室温下解冻DMSO在低温下融化较慢,建议在25°C下融化),开盖前请低速离心一下,以便将黏附于管壁的液体甩至管底。然后在您的实验体系中,按照1100 的比率(体积比体积)将抑制剂cocktail加入到样品溶液中(比如细胞  裂解液或者组织抽提物)。按照建议的用量,一管产品可以抑制20g 湿重的细胞得到的提取物中的蛋白酶。

Q问题1:为什么要用蛋白酶抑制剂Cocktail

A回答:蛋白酶抑制剂Cocktail是低毒,全面的蛋白保护试剂,最大限度地保护蛋白,使其免于被蛋白酶降解。目前生物学研究日渐深入,更多地将目标锁定为细胞中较为微量的蛋白,如信号通路蛋白、受体蛋白,采用coIPPull-down等方法获得样品。对于这些微量的珍贵样品,Cocktail能取得最佳的保护效果,比单一的抑制剂(如PMSF)更为可靠。

Q问题2:蛋白酶抑制剂Cocktail能否稀释使用?

A回答:蛋白酶活性抑制效果和很多因素有关,如目标蛋白降解的难易程度、蛋白酶的浓度、活性、抑制剂的浓度都会影响最后的保护效果。我们的蛋白酶抑制剂Cocktail采用经典浓度配比,确保对不同类型的蛋白酶都有充分的抑制效果。为了取得最好的保护效果,使用时应按照规定比例稀释,这是此类产品的共性。

Q问题3:实验中经常用PMSF来保护蛋白,蛋白酶抑制剂Cocktail和它比有什么优势?

A回答:PMSF是经典的丝氨酸蛋白酶抑制剂,以前被广泛应用于细胞裂解纯化蛋白过程。但由于PMSF在很多方面存在明显的缺点,逐步被保护效果更好更安全的蛋白酶抑制剂Cocktail所取代。PMSF的毒性较高,因此在蛋白酶抑制剂中选用AEBSF作为其替代品。AEBSF的半致死量是2834mg/kg,而PMSF200mg/kgAEBSF安全域值超过PMSF十四倍多,同时有着相当的抑制效果,对于很多丝氨酸蛋白酶的抑制比PMSF更为迅速。PMSF的另一个缺点是易降解失效,它在水溶液中的半衰期是30min,在细胞裂解过程中很容易失效。而蛋白酶抑制剂Cocktail不但保护更加全面,而且效果更加持久。

Q问题4:我应该选择哪种类型的蛋白酶抑制剂cocktail, 片剂还是溶液?

A回答:在选择cocktail产品类型的时候我们需要注意一些细节问题。两种类型的产品都含有添加物。片剂中含有若干种公司专利的未经公开的医药成分, 而溶液型产品中含有溶剂成分DMSO。一般来说这些添加物是不会影响产品效果的。在工业生产中,溶液型产品较片剂来说需要的加工步骤少,因而质量好价格低。而片剂产品在储存和运输两个环节具有优势,片剂能够在4度储存而不需要零下20度。

Q问题5DMSO会不会对我的实验造成影响?

A回答:DMSO会影响实验结果的可能性很低。在生物科学领域DMSO被作为很多生物活性物质的溶剂,比如蛋白结晶和免疫共沉淀等要求较高的实验体系中DMSO也有应用。DMSO在室温下性质稳定,在低温条件下DMSO还是优秀的细胞冷冻保护剂。

Q问题6:用了Cocktail,结果仍然不好是怎么回事?

A回答:蛋白酶抑制剂Cocktail作用是保护蛋白免受蛋白酶降解威胁,提高蛋白得率。对于绝大多数蛋白,Cocktail都有很好的效果。如果还是出现蛋白得率低的情况,需要谨慎检查实验步骤和方案设计,最大限度发挥Cocktail作用,减少导致蛋白降解的环节。例如,细胞处理前,先要将裂解体系完全准备好,预先加入Cocktail并混匀,将要破碎的细胞,收集完后或从冰箱中取出后立即加入准备好的裂解液中,给予蛋白全程保护。

订购方式

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……

4、公司汇款信息

名称:河北品科研生物科技有限公司

纳税人识别号:91130681MA0EJ81G2Q

地址:河北省保定市涿州市开发区朝阳路和谷产业园A1-5-59

电话17710261641

开户行:中国工商银行涿州支行

账号: 0409020009300376204

 

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