【产品组成】

【产品简介】

我公司生产的多浓度SDS-PAGE凝胶一步法配制试剂盒（One-step preparation kit for multiple concentration SDS-PAGE gels），提供了一步法配制SDS-PAGE凝胶(即SDS聚丙烯酰胺凝胶)所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可连续灌注下层胶和上层胶通过一步法配制SDS-PAGE胶。

本试剂盒使用一步法配胶，快速高效。与以往一步法配胶不同，简单2个试剂（A液和B液）即可完成6%、8%、10%、12%和15%等5个浓度胶的配置。

本试剂盒优化了配方，按照使用说明将相应溶液混合，再加入适量凝胶聚合催化剂溶液，混匀后即可灌胶。灌注下层胶(即分离胶)后，无需液封可直接加入上层胶(又称浓缩胶、堆积胶或积层胶)，一步完成制胶，节约配胶时间。也可以按传统配胶方式进行。

本试剂盒无须添加TEMED，避免异味。TEMED易挥发，有腐蚀性，有臭味，本试剂盒进行了优化，相应试剂中预添加了易挥发TEMED液体的替代物，正常情况下，配胶过程中无须再额外添加TEMED。

本试剂盒配制的SDS-PAGE凝胶，具有优良的分离效果。电泳后蛋白条带平整、清晰、细腻、锐利，特别是小分子蛋白质条带更清晰。

【保存】

2~8°C保存，其中APS改良型促凝剂(APS substitute solution）-20oC保存，六个月有效。

【使用方法】

1、根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度【参考附表 1】

2、制胶流程（以一块 0.75的胶为例）

按所需要配置胶体浓度，加入不同体积的下层胶A液(Resolver A)和下层胶B液(Resolver B)【参考附表 2】。

往步骤 1 中的混合溶液中加入 0.05ml 的改良型过硫酸铵溶液(APS substitute solution），充分混匀。

将步骤 2 中的溶液注入制胶玻璃板中。注意：加入下层分离胶后要在 2 min 内将上层胶浓缩胶注入凝胶模具内，且在灌注上层胶时要缓慢，防止上层胶与下层胶混合在一起。尽量减少气泡。如果个人觉得配置困难，也可改为自行用乙醇或纯水封闭之后再进行配置上层浓缩胶。

上层胶的配置：取等体积上层胶A液（Stacker A）和上层胶B（Stacker B）液混匀，然后按改良型过硫酸铵溶液：总体积=1:100，加入的改良型过硫酸铵溶液(APS substitute solution)，按照3μl/gels的体积加入染色剂(Staining agent)，充分混匀，尽量减少气泡产生。

注入制胶玻璃板中，轻轻插入梳齿。

【注意事项】

制胶数量：60gels（0.75mm胶）或＞45块（1.00mm胶）或＞30块（1.50mm胶）；

        125 gels（0.75mm胶）或＞90块（1.00mm胶）或＞60块（1.50mm胶）。

APS改良型促凝剂溶液长期保存应-20oC，4oC保存1天内有效。尽量减少室温存放时间，以防失效。

本产品使用前恢复到室温。室内温度对胶凝固时间有显著影响。22oC-25oC室内温度20分钟即可制备好胶体进行后续实验。配合我公司生产的快速电泳液和快速电转液，仅仅1.5小时即可完成转膜工作，大大减少了实验操作时间。

15%胶配置时适当延迟配置时间，22oC-25oC室内温度30分钟较好。

部分国产制胶器具插入梳子时比较紧，尽量不要产生气泡，否则容易影响加样孔形成。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【参考附表 1】

【参考附表 2】